液體活檢(Liquid biopsy)是傳統組織活檢的非侵入性的替代方法,樣本類型包括血液、血漿/血清、腦脊液、尿液、唾液等。液體活檢樣本含有非常低濃度的無細胞核酸以及細胞外囊泡/外泌體。
液體活檢有助于癌癥研究:無細胞核酸“生物標志物(biomarkers)”可用于檢測和監測腫瘤發展;
(1)細胞凋亡或壞死引起的細胞死亡會導致細胞內容物泄漏到循環系統(cfDNA/cfRNA 來源);
(2)允許檢測健康細胞 VS 疾病狀態細胞。
尿液作為液體活檢的樣本類型:
(1)血液中存在的所有物質都會通過腎臟的過濾,并可以在尿液中排出=實時健康狀況;
(2)含有多種成分,如循環腫瘤細胞、RNA、ctDNA、EVs、脫落細胞、蛋白質、代謝物;用于疾病檢測和診斷的重要生物標志物。
尿液成分:
①細胞DNA和cfDNA——可用于胎兒DNA篩查;
②循環腫瘤DNA——用于疾病監測和治療結果;
③細胞RNA和cfRNA(miRNA)——生物標志物發現;
④蛋白質——監測疾病狀態;
⑤外泌體RNA——生物標志物發現。
與血液相比的特點:
①非傳染性;
②類似于血漿/血清的核酸譜;
③易于處理;
④蛋白質濃度低;
⑤非侵入性;
⑥沒有用于分析前處理的標準化protocol。
Norgen Biotek為尿液DNA和RNA研究提供完整的工作流程解決方案:
樣品保存:
(1)樣本通常在二級設施中收集,溫度為-70℃;
(2)由于在收集階段時核酸的快速降解和微生物的生長,尿液必須在運輸前立即處理或冷凍;(尿液中的cfDNA主要通過核酸酶活性降解;尿液中的細菌生長);
(3)尿液樣本變化很大,并受健康狀況和收集時間等因素的影響。
冷凍尿液的壞處:
(1)豐富的蛋白質的沉淀 = 核酸的顯著損失;
(2)細胞破裂 = 基因組核酸污染;
(3)冷鏈運輸 = 昂貴,困難
(4)Norgen的收集和保存尿液的產品可以保存:①DNA、cfDNA;②脫落的細胞;③RNA、cfRNA;④細菌細胞;⑤外泌體;⑥病毒;⑦同時滅活細菌、真菌和病毒。
(5)相比于其他競爭對手:Norgen保存分析物的時間室溫下2 年以上。
Norgen的尿液樣本分離提取試劑盒:Norgen根據樣本類型提供專門的RNA和DNA試劑盒;
使用Norgen尿液提取試劑盒的優勢:
(1)無苯酚氯仿;
(2)無載體RNA;
(3)為任何下游應用提供無抑制劑樣品;
(4)無分子量區別或GC序列偏好;
(5)捕獲用于生物標志物研究中的小RNA。
漿液形式(Slurry)VS 柱提法(Spin Column):
Norgen基于專利的碳化硅樹脂技術,提供2種形式:漿液形式(Slurry)與柱提法(Spin Column)
(1)漿液形式(Slurry)通常用于大體積的血漿、血清和尿液;樣品與懸浮在緩沖液中的樹脂混合;
(2)對于新客戶,我們通常推薦柱提法(Spin Column);樣品通過預先裝有樹脂的色譜柱。
尿液RNA純化:
(1)從各種尿樣體積中分離RNA;
(2)簡單、快速的protocol;
(3)可用于選擇性分離外泌體RNA、cfRNA、基因組/細菌RNA或總RNA的試劑盒;
(4)無苯酚-氯仿;
(5)無載體RNA;
(6)無抑制劑RNA;
尿液DNA純化:
(1)從各種尿樣體積中分離DNA;
(2)簡單、快速的protocol;
(3)可用于選擇性分離cfDNA、基因組/細菌DNA或總DNA的試劑盒;
(4)無苯酚-氯仿;
(5)有效去除PCR抑制劑。
尿液外泌體純化:
完整尿外泌體的純化和富集;
多樣化的尿樣輸入量;
無需耗時的超速離心;
無沉淀試劑或過夜孵育;
(5)與多物種的尿液兼容;
(6)不含RNA結合蛋白;
(7)適用于多種下游應用。
Norgen的尿液外泌體純化與超速離心法(外泌體純化金標準):
與超速離心相比,Norgen 的外泌體純化技術產生更高純度和尺寸特異性的外泌體。
核酸定量:
(1)常規核酸質量檢測方法不夠靈敏;
(2)尿液和其他類型的液體活檢樣本中的cf-DNA和cf-RNA含量非常低;
(3)尿液中cf-DNA或cf-RNA的典型產量為 1-100 pg/μL (~0.001 - 0.1ng/uL);
(4)因此,無法使用典型的DNA/RNA定量方法(特別是 Nanodrop)進行定量;
(5)低豐度RNA的定量:請參閱Application Note 47 - Revised Guidelines for RNA Quality Assessment for Diverse Biological Sample Input.
艾美捷科技作為專業的生命科學領域解決方案供應商,為您推薦獨家代理Norgen Biotek品牌的各種尿液樣本提取純化試劑盒。產品僅限用于科研學術研究用途,不得用于醫療與診斷。
產品名稱及描述 | 貨號 | 上樣量 | 產品說明 |
尿液收集與保存管 | 18118 | 1-120ml | 詳情 |
尿液外泌體提取純化試劑盒 | 57700 | 250?L-30mL | 詳情 |
外泌體RNA提取試劑盒 | 58000 | 純化的外泌體體積 | 詳情 |
尿液外泌體純化和RNA提取試劑盒 | 58300 | 250?L-30mL | 詳情 |
尿液microRNA提取純化試劑盒 | 29000 | 0.5mL-1mL | 詳情 |
尿液游離DNA(cf-DNA)提取純化試劑盒 | 56600 | 250μL-30mL | 詳情 |
尿液游離RNA(cf-RNA)提取純化試劑盒 | 56900 | 100-120ml | 詳情 |
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