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    【BioVendor爆款】sRAGE(可溶性晚期糖基化終產物受體)研究工具

    發布者:艾美捷科技    發布時間:2022-06-20     
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    1、AGEs: Advanced Glycation End-products, 晚期糖基化終產物


    體內蛋白質的非酶糖基化反應是在生理條件下,體內富含醛基的葡萄糖、果糖及葡萄糖 6-磷酸酮糖與富含氨基的多種氨基酸、多肽和蛋白質分子發生縮合反應,生成不穩定的薛夫堿(Shiff bases),薛夫堿則可發生分子內的重排而生成較為穩定的阿馬多里(Amadori)重排產物。上述兩步反應均為可逆性反應,生成的產物稱為早期糖基化產物。此后該產物緩慢地經過一系列脫水、氧化及化學重排,產生高度活性的羰基化合物,如3-脫氧葡萄糖酮醛(3-deoxyglucosone,3-DG),進而與蛋白質的自由氨基起反應,凝聚形成不可逆的終末產物,稱之為晚期糖基化終產物(AGEs)。AGEs能抑制周細胞和系膜細胞的增殖,對巨噬細胞和血管平滑肌細胞的增殖則有促進作用。在糖尿病視網膜病變中,周細胞的丟失和內皮細胞功能紊亂是其關鍵的改變,可導致毛細血管閉塞和視網膜缺血。   


    在生理條件下,AGEs的形成需要經過幾周乃至數月的時間。對機體大部分細胞和血漿蛋白質來說,因其壽命較短,因而通常并不能有效完成糖基化產物的后期轉換過程,機體組織AGEs含量很低;但當蛋白質半衰期較長或者蛋白質更新延遲,如發生淀粉樣變和機體衰老,以及持續高血糖狀態,如糖尿病及其血活性的羰基化合物水平增高時,則蛋白質非酶糖基化增加,可自發地不斷形成AGEs。   


    在糖尿病病人體內,AGEs的產生多于清除,造成AGEs在體內聚集。血清AGEs的增加,可以作為評價糖尿病微血管病的嚴重程度的有效指標,它與HbA1c和尿白蛋白排泄率(UAE)密切相關。AGEs對機體的致病作用,不僅通過非受體依賴途徑使蛋白質結構和功能發生改變,促使細胞外基質增生;還可通過受體依賴途徑,與誘導單核細胞趨化和氧化應激反應,激活信號轉導通路,釋放細胞因子(IL-6、TNF-α),生長因子(TGF-β、VEGF、IGF、PDGF),黏附分子(VCAM-1、ICAM-1)和組織因子(TF),從而引起促炎性反應,使細胞基質增生,血管壁增厚,管腔狹窄,血管彈性下降,最終影響器官的結構和功能,促進糖尿病微血管病變的發生和發展。  


    2、RAGE: Receptor of AGE, AGE受體

    RAGE是目前研究最多,最明確的AGEs結合受體,屬于免疫球蛋白超家族。正常血管內皮僅少量表達 RAGE抗原和mRNA , 而在糖尿病和其它原因引起的閉塞性血管疾病中 , RAGE抗原和mRNA表達明顯增加。存在于內皮細胞、平滑肌細胞、腎小球系膜細胞、單核巨噬細胞和神經元上的RAGE與AGEs結合后 , 引起慢性細胞活化作用和組織損傷, 在糖尿病微血管病并發癥中起著重要作用。

      

    Receptor of AGE.png

      

    研究已表明 ,AGEs與RAGE結合后 ,觸發的信號通路包括 PKC的活化; JAK/STAT的酪氨酸磷酸化作用; 磷酸肌醇-3-激酶的活化; 氧化應激伴隨的 NF-κB和 AP-1轉錄的增加。AGEs與RAGE結合后 ,促進炎性介質、凝血因子、細胞黏附分子的表達 ,增加血管滲透性,參與了微血管病變的病理過程。在糖尿病腎病中, 間質纖維化和腎功能衰退是呈正相關的 , 成纖維細胞在細胞外基質中的積聚有助于纖維化疾病的發生。通過RAGE釋放的促硬化因子TGF-β的參與下,小管細胞可向成纖維細胞進行轉分化。   


    RAGE與其配體的結合,將會激活NF-κB,從而促進促炎基因的表達和RAGE自身的表達增加,形成正反饋調節。這種正反饋調節被認為是促進并延長RAGE與配體的致病作用。  


    3、sRAGE: soluble RAGE, 可溶性RAGE

    除全長的RAGE外,還有兩種剪切體,一種是N末端剪切體,功能不詳;一種是C末端剪切體,缺乏跨膜區,分泌在血漿中,系可溶性形式,也叫esRAGE (endogenous secretory RAGE)。sRAGE能結合AGEs等配體,阻止其與膜上的全長RAGE結合,從而阻斷其信號傳導通路導致的血管損害作用,同時有助于AGEs等配體的降解排出。因此sRAGE具有血管保護作用,能負向調節AGEs受體依賴的致病作用。體內RAGE剪切體的水平存在個體差異,這使糖尿病患者對血管病變的發生具有不同的易感性。   


    臨床上,sRAGE水平降低是炎癥控制缺失或者失調的標志物,與心血管疾病相關。在高血壓病人中,sRAGE水平與血壓負相關。而在腎病末期及急性肺損傷病人血清中,sRAGE水平明顯升高。 


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    Bioz.jpg

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    sRAGE蛋白:

    SDS-PAGE.png

    人SRAGE的12%分離膠SDS-PAGE結果 1. M.W. Marker - 14、21、31、45、66、97 kDa 2. 還原和加熱樣品,5ug/泳道 3. 未還原和未加熱的樣品,5ug/泳道

    RD172116100產品引文:

    1.Liu F, Teodorowicz M, Wichers HJ, van Boekel MA, Hettinga KA. Generation ofSoluble Advanced Glycation End Products Receptor (sRAGE)-Binding Ligands duringExtensive Heat Treatment of Whey Protein/Lactose Mixtures Is Dependent onGlycation and Aggregation. J Agric Food Chem. 2016 Aug 24;64(33):6477-86. doi:10.1021/acs.jafc.6b02674. Epub 2016 Aug 15. 

    2.Zenker HE, Ewaz A, Deng Y, Savelkoul HFJ, van Neerven RJJ, De Jong NW, Wichers HJ, Hettinga KA, Teodorowicz M. Differential Effects of Dry vs. Wet Heating of β-Lactoglobulin on Formation of sRAGE Binding Ligands and sIgE Epitope Recognition. Nutrients. 2019 Jun 25;11(6):1432. doi: 10.3390/nu11061432. 

    3. Zenker HE, Teodorowicz M, Ewaz A, van Neerven RJJ, Savelkoul HFJ, De Jong NW, Wichers HJ, Hettinga KA. Binding of CML-Modified as Well as Heat-Glycated β-lactoglobulin to Receptors for AGEs Is Determined by Charge and Hydrophobicity. Int J Mol Sci. 2020 Jun 26;21(12):4567. doi: 10.3390/ijms21124567. 

    4. Zenker HE, Teodorowicz M, Wichers HJ, Hettinga KA. No Glycation Required: Interference of Casein in AGE Receptor Binding Tests. Foods. 2021 Aug 9;10(8):1836. doi: 10.3390/foods10081836.


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